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當前位置:首頁資料下載MCLAB I5HD-100

MCLAB I5HD-100

發(fā)布時間:2018/7/19點擊次數(shù):634

 

Molecular Cloning Laboratories(MCLAB)成立于1998年,是為生命科學界提供基因組研究耗材和服務(wù)的先進者。

MCLAB提供具有成本效益的消耗品和試劑,專注于代以及新一代測序和DNA片段分析。我們提供大量分子生物學相關(guān)產(chǎn)品,包括抗體,生化試劑,克隆試劑盒,酶,PCR試劑盒,蛋白質(zhì)凝膠和溶液等。作為我們自己的制造商,我們可以控制生產(chǎn)流程,并大限度地減少定制和大規(guī)模訂單的延遲。它有助于確保我們的客戶獲得高質(zhì)量和價值。

MCLAB擁有一支由20 多位經(jīng)驗豐富的科學家組成的團隊,致力于為研究人員提供的服務(wù)。我們專注于基因組學領(lǐng)域,擁有DNA測序,發(fā)酵,片段分析,分子克隆,過表達,蛋白質(zhì)純化和蛋白質(zhì)合成方面的專家。我們采用量身定制的客戶服務(wù)方式,讓您有機會定制您的項目,并直接與我們的科學家團隊交流以獲得技術(shù)支持。憑借二十多年的經(jīng)驗,我們才華橫溢,技術(shù)的員工致力于為您提供所需的成果。

I-5™Hi-Fi HotStart DNA聚合酶

 

I-5 Hi-Fi DNA HotStart聚合酶是一種高保真,快速的DNA聚合酶。

名稱

貨號

描述

I-5™Hotstart DNA聚合酶

I5HD-100

250單位,2.5 U /μl

I-5™Hotstart DNA聚合酶

I5HD-200

1,250單位,2.5 U /μl

I-5™Hotstart DNA聚合酶

I5HD-OEM

任何尺寸

概述
I-5 Hi-Fi DNA HotStart聚合酶是一種超快速和高保真的DNA聚合酶。它提供了對困難模板的強大擴增,包括質(zhì)粒,BACS,基因組DNA和λDNA。它允許擴增高達8kb的人類基因組DNA和高達21kb的λDNA。它的擴展速度為1 kb / 10-15秒,具體取決于模板類型。這允許用戶通過加速PCR反應(yīng)來節(jié)省時間并提供比TaqPfu更高的保真度。該酶含有HotStart機制,可在酶加熱前使酶失活。這允許用戶在室溫下設(shè)置PCR反應(yīng)而不必擔心引物二聚體或非特異性預(yù)擴增。

特點
•快速 - 比熱啟動快4倍Taq
•穩(wěn)健 - 高抑制劑耐受性
•高產(chǎn)量 - 率
•長PCR產(chǎn)物


大腸桿菌

應(yīng)用
熱啟動PCR 
常規(guī)PCR 
快速PCR 
高通量PCR 
基因分型

提供
5X反應(yīng)緩沖液(1ml,含5X MgCl 

50mM MgCl 2(1ml)(用于優(yōu)化)

提供(緩沖液描述)
20mM Tris-HCl,100mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,200ug / ml BSA,50%甘油,1X穩(wěn)定劑,pH 8.0 @ 25℃

儲存條件
-20ºC

單位定義
一個單位是在72℃下在15分鐘內(nèi)將5nmol dNTP摻入酸不溶性物質(zhì)中的酶量。

參考
Frey,B。和Suppman,B。(1995)。Biochemica公司。2,34-35。
Chester,N。和Marshak,DR(1993)。分析生物化學。209,284-290。

運輸條件
干冰

用戶協(xié)議

 

 

25μl反應(yīng)

50μl反應(yīng)

終集中

 

 

 

 

說明

 

 

 

 

 

 

 

 

25μl反應(yīng)

50μl反應(yīng)

終集中

I-5 5X緩沖液

5 ul

10 ul

1X(見注釋)

10μM引物A.

1μl

2μl

400μM

10μM引物B.

1μl

2μl

400μM

模板DNA

如所須

如所須

看筆記

50mM MgCl 2

如所須

如所須

看筆記

I-5酶

0.5 - 1 ul

1 - 2 ul

 

水(ddH 2 O)

高達25μl

高達50μl

 

 

 

 

 

 

 

 

 

熱循環(huán)條件

 

 

 

 

 

 

 

3步PCR

 

 

 

溫度

時間

 

初始變性

98℃

2分鐘

 

變性

98℃

10秒

25-35個周期

退火

55°C - 68°C

10-15秒

 

延期

72℃

10-15秒/ kb

 

終延期

72℃

1-5分鐘

 

 

4℃下

保持

 

 

 

 

 

2步PCR(見注釋)

 

 

 

溫度

時間

 

初始變性

98℃

2分鐘

 

變性

98℃

10-15秒

25-35個周期

聯(lián)合退火和擴展

72℃

15-30秒/ kb

 

終延期

72℃

1-5分鐘

 

 

4℃下

保持

 

 

 

 

 

筆記

 

 

 

 

 

 

 

推薦的DNA模板添加

 

 

 

基因組DNA

50-250 ng

 

 

質(zhì)粒DNA

1PG-在10ng

 

 

病毒DNA

1PG-在10ng

 

 

 

 

 

 

Mg 2+

 

 

 

1X I-5 PCR Master Mix 中Mg 2+的終濃度為1.5mM

 

 

 

根據(jù)需要以0.5 mM的增量 添加額外的Mg 2+

 

 

 

建議的終Mg 2+濃度范圍為2 mM至4 mM

 

 

 

 

 

 

 

2步PCR

 

 

 

當引物T m值> 68°C 時,建議使用2步PCR

 

 

 

 

 

 

 

PCR產(chǎn)物/克隆

 

 

 

2X I-5 PCR Master Mix產(chǎn)生具有平末端的PCR產(chǎn)物

 

 

 

使用本產(chǎn)品進行PCR后,建議使用平端克隆

 

 

 

對于T / A克隆,PCR產(chǎn)物應(yīng)在A加入前純化

 

 

 

 

 

部分產(chǎn)品:

名稱

貨號

尺寸

濃度

大腸桿菌DNA連接酶

EDLA-100

1,000個單位

10,000 U / ml

大腸桿菌DNA連接酶

EDLA-200

5,000個單位

10,000 U / ml

大腸桿菌DNA連接酶

EDLA-OEM

任何尺寸

 

 

APE 1

APE-100

3,750 units

15,000 U/ml

APE 1

APE-200

15,000 units

15,000 U/ml

APE 1

APE-OEM

Any Size

 

 

名稱

貨號

描述

I-5™2X高保真混色

I5HM-100

100次反應(yīng)(50μl體積)

I-5™2X高保真混色

I5HM-200

500次反應(yīng)(50μl體積)

I-5™2X高保真混色

I5HM-5000

5,000次反應(yīng)(50μl體積)

I-5™2X高保真混色

I5HM-25K

25,000次反應(yīng)(50μl體積)

I-5™2X高保真混色

I5HM-OEM

OEM

名稱

貨號

描述

2x BlueStar™PCR Master Mix

BSPM-100

100次反應(yīng)(50μl體積)

2x BlueStar™PCR Master Mix

BSPM-200

1,000次反應(yīng)(50μl體積)

 

名稱

貨號

尺寸

HoTaq DNA聚合酶(熱啟動)

HT-200

500個單位,5 U /μl

HoTaq DNA聚合酶(熱啟動)

HT-205

2,500個單位,5 U /μl

HoTaq DNA聚合酶(熱啟動)

HT-210

5,000單位,5 U /μl

HoTaq DNA聚合酶(熱啟動)

HT-OEM

任何尺寸

名稱

貨號

描述

10 x PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)

PBS10-100

500毫升

10 x PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)

PBS10-200

1升

10 x PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)

PBS10-OEM

OEM

 

 

 

 

 

 

 

名稱

貨號

描述

I-5™Hi-Fi DNA聚合酶

PDP-100

250單位,2.5 U /μl

I-5™Hi-Fi DNA聚合酶

PDP-200

1,250單位,2.5 U /μl

I-5™Hi-Fi DNA聚合酶

PDP-OEM

任何尺寸

 

 

上海起發(fā)實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務(wù)商

1:強大的進口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

2:產(chǎn)品種類齊全,經(jīng)營超過700多個品牌,基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。

3:提供加急服務(wù),貨品一般1-2周到貨。

4:富有競爭力的價格優(yōu)勢,絕大部分價格有優(yōu)勢。

5:多年積累良好的信譽,大部分客戶提供貨到付款服務(wù)。客戶包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、國藥、fisher等藥企。

6:我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權(quán)代理。

7:我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發(fā),歡迎合作。

 

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