支原體清除試劑1(1000x)說明書

上海起發(fā)生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）屬于上海起發(fā)實驗試劑有限公司（2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌，打造優(yōu)質(zhì)的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時，把好生物產(chǎn)業(yè)鏈中的國產(chǎn)生物試劑品質(zhì)關(guān)。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè)，共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國生物制造企業(yè)，圓夢中國。

產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品描述

本公司開發(fā)的支原體清除試劑1含有抑制支原體蛋白質(zhì)合成的藥物，而支原體清除試劑2含有抑制支原體DNA合成的藥物。由于兩種試劑的作用機理不同，支原體清除試劑1需要處理不少于15天，而支原體清除試劑2只需處理7天。兩者都可以達到殺滅和清除支原體的目的。

使用方法

使用方法

（一）支原體清除試劑 1

1. 使用之前，先將支原體清除試劑1用 PBS或者無血清培養(yǎng)液稀釋10倍后，放 4℃冰箱保存。

2. 將 50-100萬個細(xì)胞鋪到 60mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿內(nèi)，加入4mL含支原體清除試劑1的正常細(xì)胞培養(yǎng)液（使用稀釋 10倍后的支原體清除試劑 1，按 1:100 比例加入）。

3. 每 2-3天更換細(xì)胞培養(yǎng)液。換液時，用 PBS沖洗 2-3 遍細(xì)胞，以將死亡的支原體清洗干凈。而后加入新鮮的含支原體清除試劑 1 的正常細(xì)胞培養(yǎng)液。期間如果細(xì)胞密度過大，請保持細(xì)胞密度適當(dāng)（貼壁細(xì)胞可能需要胰酶消化），并更換新的培養(yǎng)皿。

4. 處理15天后，可以用支原體檢測試劑盒進行檢測，檢測支原體是否殺滅。如果仍有支原體殘留，可以考慮再處理6天。

5. 以后每隔1個月進行支原體的常規(guī)檢測，以保證沒有新的支原體污染。

實驗案例分析

如上圖所示，左側(cè)為未經(jīng)支原體清除試劑處理的人Hela細(xì)胞,經(jīng)DAPI染色后，除了細(xì)胞核為藍色外，細(xì)胞質(zhì)也有大量的絮狀核酸物質(zhì)被染成藍色，這些處于細(xì)胞質(zhì)的核酸物質(zhì)就是支原體 DNA。而右側(cè)為經(jīng)過本公司的支原體清除試劑2處理7天的 Hela細(xì)胞，經(jīng)DAPI染色后，除了細(xì)胞核為藍色外，細(xì)胞質(zhì)沒有任何絮狀核酸物質(zhì)被染成藍色，說明支原體已經(jīng)被清除。

注意事項

l 建議將細(xì)胞分成三份：第一份添加清除試劑1，第二份添加清除試劑2，第三份同時添加清除試劑1和清除試劑2進行殺滅（注：同時添加兩種藥物可能對細(xì)胞的毒性較大，但是殺滅的概率會非常高）， 這樣支原體對兩種藥物同時產(chǎn)生抗性和處理過程中細(xì)胞同時死亡的概率會非常低。如果同時添加清除試劑 1 和清除試劑 2，細(xì)胞可以每 2 天更換一次培養(yǎng)液。

l 處理過程中，注意每天觀察細(xì)胞的狀況，如果發(fā)現(xiàn)支原體清除試劑對細(xì)胞的毒性較大，可以加大培養(yǎng)液中的血清濃度或者提高細(xì)胞的密度。

l 清除試劑1和清除試劑2在降低濃度后（使用稀釋10倍后的支原體清除試劑1或者 2，再按 1:500 比例加入，即藥物的最終稀釋比例為 1:5000）也可以加入到培養(yǎng)液中作為短期（1-2個月）的支原體污染預(yù)防藥物，但是不建議在細(xì)胞培養(yǎng)液中長期（超過2個月）加入，因為有可能導(dǎo)致對該兩種藥物有抗性的支原體出現(xiàn)。

運輸及保存方法