jembio 綠豆核酸酶說明書綠豆核酸酶
單鏈特異性 DNA 和 RNA 核酸內(nèi)切酶。
描述：
· 去除雙鏈 DNA 中的突出末端，形成可連接的平末端 (1)。
· 適用于修剪DNA或RNA的單鏈突出末端，不破壞雙鏈結(jié)構(gòu)(2)。
· 用于通過分析綠豆核酸酶抗性 RNA-DNA 雜交體來繪制轉(zhuǎn)錄本 (3)。
· 在 cDNA 合成過程中消化發(fā)夾結(jié)構(gòu) (4)。
· 不會切割雙鏈 DNA 中缺口對面的鏈。
· 需要 Zn2+ 離子才能發(fā)揮作用。單位定義：一個單位是使用變性小牛胸腺 DNA 在 37oC 下每分鐘生產(chǎn) 1 µg 酸溶性物質(zhì)所需的酶量。
儲存條件：儲存于-20oC。
儲存緩沖液：10 mM Tris-HCl（pH 7.5，22oC）、0.1 mM 醋酸鋅和 50% (v/v) 甘油。
反應(yīng)緩沖液：30 mM 醋酸鈉（pH 5.0，22oC）、30 mM NaCl、1 mM ZnCl2。
注意：在低緩沖和中緩沖中也有效。
檢測條件：30 mM 醋酸鈉（22oC 時 pH 5.0）、50 mM NaCl、1 mM ZnCl2、0.5 mg/ml 變性小牛胸腺 DNA 和 5% 甘油。在 1 ml 反應(yīng)體積中，在 37oC 下孵育 10 分鐘。
質(zhì)量控制：檢測所有制劑的污染雙鏈 DNase 活性。
參考：
1. Ardelt, W. 和 Laskowski, M., Sr. (1971) Biochem。生物物理學(xué)。水庫 社區(qū)。44，第 5 期，1205-1211。
2. Berk, AJ 和 Sharp, PA (1977) Cell 12, 721-732。
3. Berk, AJ 和 Sharp, PA (1978) Proc。納特爾。阿卡德?？茖W(xué)。美國 75, 1274-1278。
4. Goodman, HM 和 McDonald, RJ (1979) Methods Enzymol。68、75-90。